胎牛血清用于細(xì)胞培養(yǎng)不過百年歷史,但發(fā)展得相當(dāng)快,每年的需求量也不斷上升。在胎牛血清和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的方面,國外起步較早,認(rèn)識也較深入。應(yīng)該說,胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)基方面,具有較好的優(yōu)勢。因?yàn)槠錉I養(yǎng)全面,所以幾乎適合所有類型的細(xì)胞生長,每種細(xì)胞都可以從中攝取自己所需的養(yǎng)分。而且,胎牛血清還含有適合細(xì)胞貼壁鋪展以及抗氧化和解毒的成分,這使得它成為天然通用的優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基。
牛血清分為胎牛血清,新生牛血清,小牛血清,成牛血清。
【胎牛血清】(Foetal Bovine Serum,簡稱FBS):是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發(fā)育因子,非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng),一旦胚胎發(fā)育*這些因子自動消失。因此8個月胎齡以上的牛胚胎,已接近足月,不能作為胎牛血清的原料來使用。
【新生牛血清】(Newborn Calf Serum,簡稱NBCS):采自出生一天~一周內(nèi)的新生牛;
【小牛血清】(Calf Serum):采自出生10-30天的小牛;
【成牛血清】(Adult Bovine Serum,簡稱ABS):采自成年牛收全血后分離得到血清。
胎牛血清含有豐富的胚胎發(fā)育過程中必須的一些生長因子和激素等。胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)方面通常優(yōu)于其他類型的血清。由于胎牛從未接觸過外界, 與新生牛和小牛血清相比,抗體含量明顯降低,故抗體與培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生交叉反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)也較低,是理想的細(xì)胞生長補(bǔ)充劑。
據(jù)研究,胎牛血清中含有至少四百多種成分,而且這些成分的含量在不同批次的血清中存在波動,有時甚至波動較大。因此,在持續(xù)使用胎牛血清時,要注意盡量選同一批次的。通常,同一批次的血清數(shù)量有限,一次大約不超過2000升。因此,在更換批次時,要注意觀察細(xì)胞的生長和狀態(tài)。
目前,國內(nèi)市面上的胎牛血清有進(jìn)口,有國產(chǎn)。進(jìn)口品牌有的較為,如Gibco,但價格很高,同時假冒也多。許多高仿的Gibco血清,和真品相比,瓶子及標(biāo)簽包裝極為相似,若不仔細(xì)觀察,很難分辨出來。但實(shí)際上質(zhì)量差別較大,假冒血清價格也較低。同時,在外包裝上仍然會找到區(qū)別(如條形碼、角標(biāo)),但前提是手邊要有一瓶真品的血清。
許多實(shí)驗(yàn)室經(jīng)費(fèi)有限,這時可選擇性價比更高的血清。即與較好品牌血清的質(zhì)量差不多,但價格要低一些的血清,如Ausbian血清等。該品牌較為低調(diào),但口碑不錯,為細(xì)胞典藏等重大項(xiàng)目推薦血清。有些品牌血清,則只適用于培養(yǎng)一些容易生長的細(xì)胞,對于一些較為難養(yǎng)的細(xì)胞,則常常效果不佳。尤其是干細(xì)胞、前體細(xì)胞,對培養(yǎng)環(huán)境較為敏感,因此,要注意進(jìn)行辨別。同時,應(yīng)注意查看血清的質(zhì)控證書,尤其是病毒檢測部分,它對保證血清質(zhì)量非常重要。
血清的數(shù)據(jù)積累也可反映血清的質(zhì)量。好血清培養(yǎng)出來的細(xì)胞形態(tài)舒展,增殖旺盛,鏡下無雜質(zhì),細(xì)胞倍增時間和克隆率較為理想。同時,要注意血清對細(xì)胞培養(yǎng)的長期效果,因?yàn)橛行┯绊懚虝r間并不顯現(xiàn)。血清內(nèi)毒素也是值得注意的一個方面,因內(nèi)毒素會對細(xì)胞帶來不良影響,因此應(yīng)選用內(nèi)毒素低的血清,效果方好。文獻(xiàn)引用和報(bào)道也是血清使用數(shù)據(jù)的一部分,反映血清的使用效果,
后還要注意品牌血清的供應(yīng)情況,有些血清供應(yīng)不穩(wěn)定,這樣就會對后期實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生影響。
后祝大家實(shí)驗(yàn)順利!