利用干細(xì)胞恢復(fù)脊髓損傷(SCI)造成的功能喪失一直是科學(xué)家和醫(yī)生的雄心壯志。美國每年有近18 000人患有SCIS,另有294 000人患有SCI,通常涉及某種程度的癱瘓或身體功能下降,如膀胱控制或呼吸困難。
在發(fā)表在《細(xì)胞干細(xì)胞》雜志上的一項(xiàng)新研究中,加州大學(xué)圣地亞哥醫(yī)學(xué)院的研究人員報(bào)告說,他們成功地將高度專業(yè)化的神經(jīng)干細(xì)胞移植物直接植入小鼠的脊髓損傷中,然后記錄了移植物是如何生長和填充損傷的,與動(dòng)物現(xiàn)有的神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)結(jié)合并模仿。
這項(xiàng)研究的作者Steven Ceto說,在這項(xiàng)研究之前,該研究是醫(yī)學(xué)博士、醫(yī)學(xué)博士、神經(jīng)科學(xué)教授和加州大學(xué)圣地亞哥醫(yī)學(xué)院轉(zhuǎn)化神經(jīng)科學(xué)研究所所長馬克·圖辛斯基實(shí)驗(yàn)室的博士后研究員,在實(shí)驗(yàn)室中開發(fā)的神經(jīng)干細(xì)胞移植物是一個(gè)黑匣子。
盡管先前的研究,包括圖辛斯基及其同事發(fā)表的研究成果,在神經(jīng)干細(xì)胞移植后,SCI動(dòng)物模型的功能有所改善,但科學(xué)家并不確定到底發(fā)生了什么。
Ceto說:"我們知道受損的宿主軸突大量生長成(損傷位點(diǎn)),而移植神經(jīng)元反過來又將大量軸突延伸到脊髓,但我們不知道移植物本身實(shí)際上發(fā)生著什么樣的活動(dòng)。"我們不知道主機(jī)和嫁接軸是否確實(shí)在建立功能連接,或者它們是否看起來就像它們一樣。
Ceto、Tuszynski和他的同事利用了近的技術(shù)進(jìn)步,使研究人員能夠刺激和記錄基因和解剖學(xué)上定義的神經(jīng)元群體的活動(dòng),這些神經(jīng)元群體具有光而不是電。這確保了他們確切地知道哪些宿主和移植神經(jīng)元在起作用,而不必?fù)?dān)心電流通過組織傳播,并給出潛在的誤導(dǎo)性結(jié)果。他們發(fā)現(xiàn),即使沒有特定的刺激,移植神經(jīng)元在具有高度相關(guān)活性的不同神經(jīng)元群中自發(fā)發(fā)射,就像正常脊髓的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)一樣。當(dāng)研究人員刺激來自動(dòng)物大腦的再生軸突時(shí),他們發(fā)現(xiàn)一些相同的自發(fā)活性的移植神經(jīng)元群反應(yīng)強(qiáng)勁,表明這些網(wǎng)絡(luò)從通常驅(qū)動(dòng)運(yùn)動(dòng)的輸入中接收功能突觸連接。感官刺激,如輕觸和捏,也激活移植神經(jīng)元。
Ceto說:"我們表明,我們可以通過刺激移植軸突進(jìn)入這些區(qū)域來打開損傷場(chǎng)下脊髓神經(jīng)元。"將所有這些結(jié)果放在一起,事實(shí)證明,神經(jīng)干細(xì)胞移植具有非凡的能力,能夠自我組裝成脊髓狀的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò),這些神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)在功能上與宿主神經(jīng)系統(tǒng)集成。經(jīng)過多年的推測(cè)和推論,我們直接表明,跨越脊髓損傷的神經(jīng)元繼電器的每個(gè)構(gòu)建基塊實(shí)際上都具有功能性。
Tuszynski說,他的團(tuán)隊(duì)目前正在研究幾種途徑,以加強(qiáng)干細(xì)胞移植的功能連接,如組織移植物的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu),以模仿正常的脊髓與腳手架,并使用電刺激加強(qiáng)宿主和移植神經(jīng)元之間的突觸。
Tuszynski說:"雖然干細(xì)胞、刺激、康復(fù)和其他干預(yù)措施的完美結(jié)合可能要過幾年,但患者現(xiàn)在患有脊髓損傷。"因此,我們目前正與監(jiān)管機(jī)構(gòu)合作,盡快將干細(xì)胞移植方法引入臨床試驗(yàn)。如果一切順利,我們可以在這十年內(nèi)進(jìn)行治療。
來源:生物幫
1、注意避免沉淀加入培養(yǎng)液
添加胎牛血清的時(shí)候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液,因?yàn)槿绻囵B(yǎng)液有沉淀的存在,會(huì)使得其中培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)生大量的黑點(diǎn),除此之外,細(xì)胞的表面還很可能會(huì)覆蓋一層油狀物質(zhì),總之出現(xiàn)這樣的情況會(huì)極其不利于細(xì)胞的正常生長。那么為了較大程度減少血清的損失,可以把所有有沉淀的血清進(jìn)行收集并做離心處理,之后便可將上清液加入培養(yǎng)液中使用。
2、注意解凍的方法
再高質(zhì)量的胎牛血清也要在使用的時(shí)候堅(jiān)持謹(jǐn)慎的原則,因此在解凍血清的時(shí)候,要細(xì)心地考慮到其解凍時(shí)體積一般會(huì)增大的特點(diǎn),事先為血清預(yù)留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來,便不會(huì)發(fā)生污染或者容器凍裂的情況。另外較好采用通用的解方式解凍血清。
3、注意血清的滅活方法
胎牛血清的滅活,一般是用水浴加熱的方式來加熱已經(jīng)*解凍的血清,那么需要注意的是,加熱的過程中一定要規(guī)則地將血清搖晃均勻。而之所以這么做,是為了能夠讓血清中的補(bǔ)體成分去活化。不過胎牛血清的滅活并不是強(qiáng)制的要求,客戶可以自行選擇是否進(jìn)行滅火處理。