胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。
顯然,胎牛血清是品質(zhì)非常高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分最少。
胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用:
1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。
2.提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)節(jié)它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
7.參與細(xì)胞凍存。
在細(xì)胞培養(yǎng)中,胎牛血清加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基的濃度大多為5%~20%(最常見為10%)的。具體到不同試驗(yàn),應(yīng)依據(jù)文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo),或細(xì)胞類型或基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成分來(lái)確定最佳濃度。 胎牛血清應(yīng)在-20℃儲(chǔ)存,運(yùn)輸應(yīng)干冰冷鏈運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優(yōu)良品質(zhì)。
我們的建議是盡量選擇同一批次的血清。對(duì)于血清中某些指標(biāo),比如蛋白含量等,有特殊要求,可告知我們,會(huì)盡可能挑選符合需求的批次。
同一批次間不同瓶血清的差異,肯定是要小于不同批次的。
不同飼養(yǎng)條件下、不同品種,統(tǒng)一的流水線上操作的不同員工,都會(huì)導(dǎo)致同一品牌不同批次的血清略有差別。不同批號(hào)的血清在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)中混用,很難保證細(xì)胞不會(huì)因?yàn)椤革嬍场垢淖兌K?shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不穩(wěn)定這樣的「小脾氣」。
就比如,下圖是某批次血清成分檢測(cè)情況,其中各類免疫球蛋白的含量會(huì)根據(jù)不同批次而發(fā)生變化,如果實(shí)驗(yàn)中對(duì)于血清中這類蛋白含量有要求的話,就要注意盡量買同一批次的血清。