細(xì)胞培養(yǎng)基
Cell Culture
細(xì)胞培養(yǎng)基是細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)過程中,常用的科研試劑,是大規(guī)模體外培養(yǎng)和繁殖細(xì)胞的重要工具。
適宜的細(xì)胞培養(yǎng)基,提供了細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)、生長因子和環(huán)境條件。不同類型的細(xì)胞需要的培養(yǎng)基可能會有所不同。
在過去的幾十年中,科學(xué)家們已經(jīng)開發(fā)出多種不同種類的細(xì)胞培養(yǎng)基,以滿足不同細(xì)胞類型和研究需求。本期內(nèi)容盤點(diǎn)細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷程,以及常見的細(xì)胞培養(yǎng)基。
細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展
細(xì)胞培養(yǎng)基的起步階段
(20世紀(jì)早期)
20世紀(jì)早期,是細(xì)胞培養(yǎng)基的起步階段。主要使用簡單的培養(yǎng)基,如雞蛋白、牛血清和生理鹽水等。雖然這類培養(yǎng)基提供了基本的生長和營養(yǎng)條件,但缺乏細(xì)胞所需的復(fù)雜因子和特定的生長因子。
更專業(yè)的培養(yǎng)基出現(xiàn)
(20世紀(jì)中葉)
隨著細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展,Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM)和Minimum Essential Medium(MEM)等培養(yǎng)基被引入。這類培養(yǎng)基根據(jù)動物細(xì)胞的營養(yǎng)需求進(jìn)行改良的培養(yǎng)基,提供了更多必需營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子,促進(jìn)了細(xì)胞的生長和增殖,這標(biāo)志著細(xì)胞培養(yǎng)基從簡單向復(fù)雜的轉(zhuǎn)變。
補(bǔ)充因子的添加
為了更好地模擬體內(nèi)環(huán)境,研究人員開始向培養(yǎng)基中添加補(bǔ)充因子,如胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、生長因子、激素和維生素等。這些添加物的引入提供了更好的細(xì)胞生長和分化條件,使得細(xì)胞在體外能夠更好地模擬體內(nèi)情況。
定制化培養(yǎng)基的發(fā)展
(近些年來)
隨著研究需求的不斷增加,研究人員開始根據(jù)特定細(xì)胞類型的需求,調(diào)整和優(yōu)化培養(yǎng)基的配方和組成。這些定制化的培養(yǎng)基更加精確地滿足了特定細(xì)胞類型的生長、增殖和功能要求。通過這種個性化的方法,細(xì)胞培養(yǎng)的效果得到了顯著提高。
三維培養(yǎng)基和生物打印技術(shù)的發(fā)展
近年來,隨著三維培養(yǎng)和生物打印技術(shù)的發(fā)展,培養(yǎng)基也在不斷創(chuàng)新和進(jìn)化。傳統(tǒng)的平面細(xì)胞培養(yǎng)已經(jīng)不能滿足復(fù)雜的組織和器官工程的需求。因此,研究人員開始開發(fā)新型的細(xì)胞培養(yǎng)基,如支架型培養(yǎng)基和生物透明基質(zhì),以提供更接近體內(nèi)的三維環(huán)境。這些創(chuàng)新的培養(yǎng)基在組織工程、再生醫(yī)學(xué)和藥物篩選方面具有重要的應(yīng)用前景。
常見的細(xì)胞培養(yǎng)基
DMEM
(Dulbecco's Modified Eagle Medium)
DMEM是常見的細(xì)胞培養(yǎng)基之一,適用于多種哺乳動物細(xì)胞的培養(yǎng)。它含有必需氨基酸、維生素、糖類和鹽類,并添加了胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白和膽固醇等成分,以支持細(xì)胞的生長和代謝。DMEM通常用于腫瘤細(xì)胞系、成纖維細(xì)胞和某些免疫細(xì)胞的培養(yǎng)。
RPMI 1640
(Roswell Park Memorial Institute 1640 Medium)
除了常規(guī)的腫瘤細(xì)胞系,RPMI 1640也適用于淋巴細(xì)胞和白血病細(xì)胞等免疫細(xì)胞的培養(yǎng)基。它與DMEM類似,但在氨基酸和維生素的組成上略有不同。由于其適用于多種白血病和淋巴瘤細(xì)胞系,RPMI 1640成為免疫學(xué)研究中常用的細(xì)胞培養(yǎng)基之一。
MEM
(Minimal Essential Medium)
刪去賴氨酸、生物素,氨基酸濃度增加,是一種常用的低營養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)基,適用于需要較低營養(yǎng)要求的單層生長細(xì)胞。MEM常被用于對細(xì)胞生理學(xué)、毒性學(xué)和抗腫瘤藥物研究等領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)。
Neurobasal培養(yǎng)基
Neurobasal培養(yǎng)基是專門用于神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)的一種培養(yǎng)基。它包含有機(jī)和無機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)、生長因子和神經(jīng)營養(yǎng)因子,以模擬神經(jīng)細(xì)胞在體內(nèi)的生長環(huán)境??筛鶕?jù)研究需求進(jìn)行個性化調(diào)整,從而滿足各種神經(jīng)細(xì)胞類型的培養(yǎng)要求。它在神經(jīng)科學(xué)研究中被廣泛應(yīng)用,用于研究神經(jīng)發(fā)育、神經(jīng)退行性疾病和神經(jīng)毒性等領(lǐng)域。
DMEM/F-12
DMEM/F-12是一種常用的復(fù)合細(xì)胞培養(yǎng)基,結(jié)合了DMEM和Nutrient Mixture F-12的特點(diǎn)。該培養(yǎng)基是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的,現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物,這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng)。
Ausbian干細(xì)胞培養(yǎng)基
在含微量胎牛血清的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,通過添加一種人永生化干細(xì)胞系的條件培養(yǎng)基混合組成,是一款即用型干細(xì)胞培養(yǎng)基。
Ausbian干細(xì)胞培養(yǎng)基此款培養(yǎng)基含有多種促進(jìn)細(xì)胞增殖的生長因子,如:表皮生長因子(EGF)、成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)、神經(jīng)細(xì)胞生長因子(NGF)、肝細(xì)胞生長因子(HGF)、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、血小板衍生生長因子(PDGF)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)及干細(xì)胞分化抑制因子等。
Ausbian干細(xì)胞培養(yǎng)基,廣泛支持多種人及動物的胚胎干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞及各種組織來源的成體干細(xì)胞的培養(yǎng)。
Ausbian干細(xì)胞培養(yǎng)基富含多種促細(xì)胞增殖的生長因子,因此,在各類干細(xì)胞培養(yǎng)過程中,可確切有效地促進(jìn)干細(xì)胞增殖、抑制干細(xì)胞分化及維持干細(xì)胞表型,增加干細(xì)胞的傳代次數(shù)的作用。
Ausbian干細(xì)胞培養(yǎng)基已經(jīng)過生物學(xué)安全性檢驗(yàn),并通過放射性輻照滅活,確保產(chǎn)品的無菌性和安全性。