動(dòng)物血清是生命科學(xué)、生物醫(yī)學(xué)研究中,中常用的一種試劑,它含有豐富的蛋白質(zhì)、激素和其他生物分子,對(duì)細(xì)胞生物學(xué)相關(guān)研究有重要意義。
然而,有時(shí)我們可能會(huì)在血清中觀察到白色絮狀沉淀的存在,這引起了科研人員的關(guān)注。本文將揭秘血清中白色絮狀沉淀的原因,并提供一些解決方法。
1、蛋白質(zhì)沉淀:血清中的蛋白質(zhì)在特定條件下可以發(fā)生聚集和沉淀,形成白色絮狀物質(zhì)。這可能是因?yàn)閜H的變化、溫度的升高、離子強(qiáng)度的變化等因素導(dǎo)致的。
2、脂質(zhì)沉淀:某些血清樣本中含有高濃度的脂質(zhì),當(dāng)血清遭受震動(dòng)或劇烈攪拌時(shí),脂質(zhì)會(huì)凝聚并形成白色絮狀沉淀。
3、微生物污染:血清營養(yǎng)豐富,如果在使用過程中操作不規(guī)范,很有可能被微生物污染,產(chǎn)生白色沉淀。一般表現(xiàn)為:血清解凍后無明顯沉淀,但使用一段時(shí)間后,出現(xiàn)了大量沉淀。
一般來說,正常的蛋白質(zhì)沉淀和脂質(zhì)沉淀,不會(huì)影響血清的功能。而微生物污染引起的血清沉淀,危害比較大,建議直接丟棄,并對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境進(jìn)行清潔,更換新的血清。
血清如需長期儲(chǔ)存,建議保存在-20℃的環(huán)境中,溫度經(jīng)常改變,導(dǎo)致血清反復(fù)凍融,會(huì)更容易造成沉淀的產(chǎn)生,因此在運(yùn)輸途中,應(yīng)全程冷鏈運(yùn)輸,減少因反復(fù)凍融而出現(xiàn)沉淀的現(xiàn)象。
解凍血清時(shí),建議采用三步法,解凍時(shí),規(guī)則搖晃均勻,使溫度及成分均一,達(dá)到充分混合血清的目的,確保其中的成分均勻分散。
在日常在使用血清時(shí),解凍好的血清不宜將血清置于37℃太久,否則高溫容易使血清變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。
常規(guī)情況下,胎牛血清無需熱滅活。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,則不建議進(jìn)行熱滅活。
非生物污染因素產(chǎn)生的血清沉淀,不會(huì)影響血清本身的功能,但從使用體驗(yàn)角度出發(fā),大量的沉淀很容易遮擋視線,影響對(duì)培養(yǎng)基狀態(tài)的觀察;而微量沉淀又容易與細(xì)胞污染混淆,影響實(shí)驗(yàn)人員的判斷。
因此,如果血清中有非生物污染的沉淀,想要去除,該如何操作呢?
我們推薦采用低速離心的方法:1000rpm以內(nèi),1-2分鐘,或簡單讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無菌瓶里。
一般不推薦過濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無法過濾。
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