亚洲图片小说专区综合区-网址你懂的日韩精品中文字幕-日本一区二区视频在线免费-日韩亚洲国产中文字幕欧美

當(dāng)前位置:首頁  >  新聞資訊  >  透析胎牛血清做滅活處理,應(yīng)該怎么處理呢

透析胎牛血清做滅活處理,應(yīng)該怎么處理呢

更新時間:2021-12-27  |  點擊率:843
  將該病毒的F蛋白(融合蛋白)序列克隆入質(zhì)粒內(nèi),并轉(zhuǎn)染293T細胞。轉(zhuǎn)染后第20小時,細胞先在不含蛋氨酸和半胱氨酸的DMEM+透析胎牛血清中培養(yǎng)了45分鐘(讓細胞處于饑餓狀態(tài),因培養(yǎng)基中缺少氨基酸),再在同樣上述培養(yǎng)基中培養(yǎng),但添加了35S標記的蛋氨酸和半胱氨酸。
  培養(yǎng)4小時后進行分析。即裂解細胞后,用抗F蛋白的抗體捕獲F蛋白、跑膠并進行放射自顯影,分析F蛋白的表達情況。發(fā)現(xiàn)F蛋白的表達確實增加了,但突變后的F蛋白表達卻無任何變化。結(jié)果證實,野生型的F蛋白確實參與病毒對宿主細胞的侵襲。
  值得指出的是,用35S標記的蛋氨酸和半胱氨酸用來標記細胞內(nèi)的蛋白,結(jié)合免疫沉淀用于觀察在某一過程中發(fā)生的某一蛋白的變化,從而發(fā)現(xiàn)該蛋白所扮演的角色,的確是一個普遍有效的方法(在研究信號分子磷酸化的方面,則需要使用32P標記的磷酸鹽)。
  透析胎牛血清是否需要做滅活處理?這取決于您的應(yīng)用。
  滅活過程中,會導(dǎo)致血清中某些成分被破壞,如氨基酸,維生素,生長因子等。所以只有在您的實驗對血清有特殊要求時,才會考慮對血清進行滅活處理。如您的實驗對血清中的某種組分敏感,需要去除該組分。常見的情況是需要去除血清中的補體蛋白,因為補體在機體中參與細胞殺傷,巨噬細胞和淋巴細胞活化,肥大細胞和血小板組胺釋放,平滑肌收縮等過程,所以一般在免疫學(xué)相關(guān)研究中及肌細胞和干細胞的培養(yǎng)過程中需要對血清進行滅活處理。
  
姚安县| 清镇市| 五莲县| 长治市| 安多县| 方山县| 进贤县| 什邡市| 三亚市| 墨竹工卡县| 图木舒克市| 台湾省| 衡阳市| 富阳市| 邳州市| 深水埗区| 八宿县| 神农架林区| 渑池县| 仪征市| 夹江县| 报价| 桂阳县| 曲周县| 大新县| 澄城县| 内丘县| 苏州市| 万荣县| 阿合奇县| 天峨县| 新田县| 平原县| 邳州市| 姜堰市| 咸阳市| 南通市| 阜新| 渭源县| 新宁县| 靖远县|