今天我們來聊聊,如何祛除珍貴細(xì)胞/生物樣本中的支原體污染。
1.珍貴細(xì)胞/生物樣品支原體祛除
適用范圍
不易獲得的生物樣本或珍貴的細(xì)胞,被支原體污染了,但需要挽救,不能丟棄, 例如:珍XI的細(xì)胞種子??刹捎肕ynox®或Mynox® Gold。
若是無法長期培養(yǎng)的珍貴樣本或病毒收貨液,則推薦使用德國MB公司的Mynox® ,處理3小時(shí),直接殺除。
若是可以培養(yǎng)超過一個(gè)月的細(xì)胞,則推薦使用德國MB公司的Mynox® Gold,直接殺除+鞏固防護(hù)兩步處理。
2.產(chǎn)品特點(diǎn)
Mynox® 特點(diǎn)
(1)快速、有效。針對無法長期培養(yǎng)的珍貴樣本,使用Mynox®處理細(xì)胞3小時(shí)左右,即可祛除支原體。
(2)不含抗生素,不會誘導(dǎo)支原體耐藥。
注意:Mynox® 處理后的細(xì)胞由于支原體破潰,此時(shí)做支原體PCR檢測,會呈強(qiáng)陽性。建議傳代3-4次以后,再做PCR檢測,此時(shí)會呈陰性。
Mynox® Gold特點(diǎn)
(1)治療液Mynox+鞏固液的設(shè)計(jì),祛除支原體的同時(shí),可進(jìn)一步在后續(xù)培養(yǎng)中鞏固清除效果,防止支原體“卷土重來"。
(2)不含抗生素,不會誘導(dǎo)支原體耐藥。
3.使用方法
Mynox® 使用方法
(1)細(xì)胞重新傳代時(shí),用含Mynox®、5%FBS的的培養(yǎng)基替換原有培養(yǎng)基,對細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。
(2)孵育培養(yǎng)2-3小時(shí)。
(3)對細(xì)胞進(jìn)行換液。
(4)用不含Mynox®的正常培養(yǎng)基(原始培養(yǎng)條件)對細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),傳代3-4次。
(5)對細(xì)胞進(jìn)行支原體檢測。
Mynox® Gold使用方法
(1)治療液與含5%FBS的培養(yǎng)及混合。
(2)將混合后的治療液添加至培養(yǎng)皿中。
(3)將接種細(xì)胞。
(4)培養(yǎng)細(xì)胞至80%-90%匯合后,進(jìn)行傳代。
(5)傳代的同時(shí)加入鞏固液
重復(fù)(4)(5)兩次
(6)再無Mynox® Gold的情況下傳代
(7)用Venor® Gem支原體檢測試劑盒檢測