在疫苗生產(chǎn)、生物制藥和細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)中，支原體污染的預(yù)防和祛除，是保證生產(chǎn)質(zhì)量和實(shí)驗(yàn)順利的重要環(huán)節(jié)。

Minerva Biolabs

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德國(guó)MB

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眾多的大型生物藥廠以及數(shù)不過來的生物實(shí)驗(yàn)室，預(yù)防、檢測(cè)，祛除支原體的產(chǎn)品，都更青睞MB公司的相關(guān)產(chǎn)品。

本期內(nèi)容，我們將把MB品牌的『環(huán)境中支原體祛除、細(xì)胞中支原體檢測(cè)與祛除』產(chǎn)品，簡(jiǎn)明扼要地介紹給大家，希望對(duì)疫苗生產(chǎn)、生物制藥、細(xì)胞治療、CAR-T等項(xiàng)目的質(zhì)檢質(zhì)控，以及更多實(shí)驗(yàn)室的科研工作者，能有所幫助。

環(huán)境中

支原體祛除

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德國(guó)MB

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實(shí)驗(yàn)環(huán)境中，支原體的祛除方法有很多。

但實(shí)際操作過程中，還是使用支原體專用清除噴霧或濕巾，更加高效、安全和便捷。

德國(guó)MB公司的Mycoplasma-off™可以算是“業(yè)界頂流”，有以下幾個(gè)特點(diǎn)：

（1）快速有效

噴霧劑中含有支原體專用殺除劑Mynox®，可在幾分鐘內(nèi)迅速殺除支原體。

（2）廣譜抗菌

不僅能祛除支原體，而且能有效祛除葡萄球菌、腸球菌、大腸桿菌、奇異變形桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌、牛腹瀉病毒、腺病毒、多瘤病毒、鼠諾如病毒、牛痘病毒、真菌孢子等。

（3）無腐蝕性和致癌性

乙醇作為溶劑，無腐蝕性和致癌性成分

（4）操作簡(jiǎn)便

即用型消毒液，可以快速簡(jiǎn)單地保持工作區(qū)的清潔干凈。噴霧劑噴灑待消毒的表面，等待5-10min后，用干凈紙巾擦拭。無菌通風(fēng)2-3分鐘。

對(duì)于水浴鍋、培養(yǎng)箱水槽等環(huán)境，可以選擇Water Shield™對(duì)其進(jìn)行處理。與其他抑菌類產(chǎn)品相比，有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)：

• 長(zhǎng)效：Water ShieldTM含表面活性劑、季銨鹽和絡(luò)合劑，不易揮發(fā)，可持續(xù)作用4周。

• 安全：不含醛類或疊氮化物，對(duì)細(xì)胞無毒害。

• 廣譜：預(yù)防支原體、細(xì)菌、真菌、霉菌、孢子污染。

• 方便：Water ShieldTM按1:200比例，直接加入水中，使用方便。

• 不產(chǎn)生水垢。

細(xì)胞中

支原體檢測(cè)

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德國(guó)MB

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要想準(zhǔn)確判斷細(xì)胞是否被支原體污染，光靠觀察法是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的，靈敏度更高、特異性更強(qiáng)、耗時(shí)短、操作便捷的PCR法則是更好的選擇。其中，qPCR和常規(guī)PCR分別有其不同的適用場(chǎng)景及特點(diǎn)。

qPCR檢測(cè)

更適合疫苗等工業(yè)生產(chǎn)用戶使用，主要用到Venor®Gem qEP支原體檢測(cè)試劑盒。該檢測(cè)試劑盒有以下幾個(gè)特點(diǎn)：

1、遵循歐洲藥典和日本藥典操作流。

2、高特異性，一次檢測(cè)即可涵蓋所有常見易感染細(xì)胞的支原體物種（包括歐洲藥典規(guī)定的9種支原體）。與細(xì)菌和真核DNA無交叉反應(yīng)。

3、高靈敏度，zui低檢測(cè)限可達(dá)到≤10CFU/ml。

4、相應(yīng)配套的支原體基因組DNA和細(xì)菌基因組DNA，便于特異性驗(yàn)證。

5、有相應(yīng)配套的支原體絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品，便于最后定量檢測(cè)。

常規(guī)PCR檢測(cè)

如果僅是實(shí)驗(yàn)室日?？蒲羞^程中使用，無需對(duì)支原體進(jìn)行定量檢測(cè)，則可以選擇Venor® Gem Classic支原體常規(guī)PCR檢測(cè)試劑盒。

該試劑盒高特異性，僅一條陽(yáng)性對(duì)照條帶，即可涵蓋所有可能感染細(xì)胞的支原體物種。操作簡(jiǎn)單，易于觀察。且覆蓋面廣，歐洲藥典要求的26種支原體均可檢出。該試劑盒可檢測(cè)出1種脲原體、7種無膽甾原體和85種支原體，與細(xì)胞和真核DNA無交叉反應(yīng)。

細(xì)胞中

支原體祛除

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德國(guó)MB

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一般情況下，細(xì)胞感染支原體，我們建議直接丟棄并對(duì)環(huán)境進(jìn)行消毒處理，但總有一些特殊情況，導(dǎo)致我們?cè)敢鈦G棄辛苦培養(yǎng)的細(xì)胞，這時(shí)就可以派細(xì)胞用支原體祛除試劑上場(chǎng)了。

Mynox®

對(duì)于無法長(zhǎng)期培養(yǎng)的珍貴樣本或病毒收獲液，則推薦使用德國(guó)MB公司的Mynox® 。含有「治療液」和「鞏固防護(hù)液」。

「治療液」來自枯草桿菌提取物，可特異性地與支原體膜結(jié)合，改變支原體膜通透性，從而使支原體在2-3小時(shí)內(nèi)破潰死亡。

「鞏固防護(hù)液」加入培養(yǎng)基，后續(xù)培養(yǎng)一個(gè)月，細(xì)胞將會(huì)清除支原體的污染，確切有效。

Mynox® Gold

若是可以培養(yǎng)超過一個(gè)月的細(xì)胞，則推薦使用德國(guó)MB公司的Mynox® Gold，直接殺除+鞏固防護(hù)兩步處理，祛除支原體的同時(shí)，可進(jìn)一步在后續(xù)培養(yǎng)中鞏固清除效果，防止支原體“卷土重來”。

Zell Shield®

適合細(xì)胞已發(fā)生支原體污染，但又不愿丟棄，希望繼續(xù)培養(yǎng)：如已轉(zhuǎn)染或大量擴(kuò)增的細(xì)胞的情況。復(fù)合抗生素成分，抑制支原體蛋白和DNA合成，也抑制細(xì)菌和真菌。

先使用廠家推薦的“懸浮沖洗法”處理好細(xì)胞，再使用加了Zell Shield®的培養(yǎng)基養(yǎng)細(xì)胞，能達(dá)到更好的祛除支原體的效果。